作者:西安博爾 發(fā)布日期: 2021-03-16 瀏覽量:
核酸檢測實驗室內(nèi)要靠高投入采購高品質(zhì)的試劑和儀器來提高檢測的靈敏度,但是當(dāng)檢測量非常大的時候,誰也不能保證百分之百不出問題。核酸檢測實驗室準(zhǔn)確的核心應(yīng)該是人和嚴(yán)格的試驗流程和管理制度。我們能做的是隨時保持警惕,盡早發(fā)現(xiàn),及時處置,最大程度減少損失。核酸檢測實驗室發(fā)生污染如何緊急處理呢?下面博爾實驗室小編根據(jù)實驗室工作人員的一次親身經(jīng)歷來為大家解答。
實驗員發(fā)現(xiàn)在一次qPCR實驗中雖然陰性對照成立,但是4份陰性樣品出現(xiàn)了擴增曲線。可以確定實驗中發(fā)生了污染,但是從何時開始污染的?污染源是什么?影響到的試驗有多少?這個時候我們需要一一排查,實驗室一旦發(fā)生污染,第一時間不是糾結(jié)于到底哪里污染了,到底誰的責(zé)任導(dǎo)致的污染。絕大多數(shù)時間我們無法確定污染源,更不能輕易排除一項污染源。而是第一時間果斷采取清除污染的措施。做好如下工作:
1.停止所有實驗活動,查看當(dāng)天所有的試驗結(jié)果,發(fā)現(xiàn)只有一個實驗受到了污染。
2.清理試劑準(zhǔn)備區(qū)、核樣本制備區(qū)和擴增區(qū)所有開封的試劑耗材;
3.離心管架、試管架等可重復(fù)使用的物品浸泡到84消毒液中過夜,第二天用清水清洗后晾干使用;
4.對移液器內(nèi)外表面、核酸提取儀內(nèi)部先用酒精擦拭后,再用核酸去除劑擦拭,同時啟用備用的移液器;
5.對各區(qū)的生物安全柜、潔凈工作臺和實驗臺面先用酒精擦拭后,再用核酸去除劑擦拭;
6.對實驗室地面用84消毒液進(jìn)行清潔;
7.開窗通風(fēng)。
污染清除的實驗驗證
1.在試劑準(zhǔn)備區(qū)的潔凈工作臺面、樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)部、核酸提取儀內(nèi)部和擴增區(qū)臺面分別放置開蓋裝有PBS的離心管,過夜;
2.用采樣拭子蘸PBS后對實驗臺面、生物安全柜臺面和潔凈工作臺面反復(fù)擦拭后,放入PBS中進(jìn)行洗脫。
3.用采樣拭子蘸PBS后對移液器的內(nèi)外表面進(jìn)行取樣,取樣后放入PBS中進(jìn)行洗脫。
4.將配液的移液器和加模板的移液器換上無濾芯槍頭,在PBS中反復(fù)吹吸10次,測試移液器內(nèi)部是否存在污染。
5.測試結(jié)果
5.1測試結(jié)果發(fā)現(xiàn)樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器內(nèi)外表面擦拭拭子為核酸陽性,其他檢測都是陰性。
5.2對樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器進(jìn)行清潔和擦拭后,第二天對該移液器內(nèi)表面和外表面擦拭拭子進(jìn)行檢測,仍有擴增分別為39.89和39.63。
5.3對樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器進(jìn)行清潔和擦拭后,過二天后對該移液器內(nèi)表面和外表面擦拭拭子進(jìn)行檢測,檢測結(jié)果為陰性。
持續(xù)監(jiān)測
本次實驗室污染事件發(fā)現(xiàn)到針對性解決,一共用時五天。最終可以確定是樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器發(fā)生了污染。但是由于可能造成污染的因素很多,移液器是否是唯一的污染因素我們很難確定。后續(xù)的幾天仍然在檢測中增加陰性對照,持續(xù)對環(huán)境等樣品進(jìn)行監(jiān)測,確保污染被徹底清除。
很多檢測實驗室被持續(xù)的不定期核酸污染所困擾,很重要的原因是未能及時發(fā)現(xiàn)污染并在第一時間徹底的處理。每個實驗室都應(yīng)該結(jié)合自己實驗室的情況建立規(guī)范的污染處置規(guī)程,確保在下一次污染發(fā)生時能盡早盡快解決。